הפקת הגן לאינסולין בPCR

[CommandeRiker]

הפקת הגן לאינסולין בPCR

היי,
רציתי לשאול.. במידה ואני רוצה להגביר את הגן לאינסולין במכשיר PCR, ויש לי את הפריימרים המתאימים וכו'
האם אני מכניס לPCR ספריית CDNA או ספריית DNA גנומי ?
ומה יקרה בהכנסה של כל אחד?

תודה רבה!

 

[Gidi Shemer]

מה היעד שלך?

 

[CommandeRiker]

היעד הוא סנתוז אינסולין

וזאת שאלה ממבחן חח לא שלי אישית

 

[Gidi Shemer]

תנסה לחשוב באיזו מערכת הסנתוז ייעשה

האם במערכת פרוקריוטית או אאוקריוטית. זה ייתן לך רמז על המקור העדיף ממנו תרצה לשלוף את הגן (בהנחה שאתה מכיר את ההבדל בין דנא גנומי ל- cDNA)

 

[CommandeRiker]

הסנתוז ייעשה במערכת חיידקית

משום כך, אני חשבתי שספריית DNA גנומית תהיה לא יעילה בכלל, מהסיבה של מקטעים שלא יעברו SPLICING
השאלה היא אבל מה מוגדר כDNA גנומי? האם זה כל הגנום? רק הגן לאינסולין ?

תודה!

 

[Gidi Shemer]

אכן קלעת

דנא גנומי זה כל דנא שמכיל את הדנא המקורי, כולל אינטרונים ואקסונים. זה יכול להיות כל הגנום, מספר גנים, גן אחד, או חלק מגן.
בדיוק מהסיבה שפירטת, תהיה בעיה להשתמש בדנא גנומי והמקור המתאים יהיה cDNA

 

[CommandeRiker]

תודה רבה!